| 课程号 |
01132677 |
学分 |
1 |
| 英文名称 |
Molecular Biology Experiments |
| 先修课程 |
分子生物学理论课，学习实验课相关原理。 微生物学理论课，学习微生物操作的原理和方法。 |
| 中文简介 |
本课程旨在培训学生分子生物学基本的实验方法和技术。在实验过程中使学生掌握基础分子生物学实验的基本原理和结果分析方法，并得到相应的实验技能和操作训练。课程主要包括以下几个部分：
1. 质粒DNA的分离纯化。
2. DNA的限制性内切酶消化。
3. DNA琼脂糖凝胶电泳。
4. 利用PCR技术扩增GFP基因。
5. Gibson assembly构建pET28a-EGFP表达载体。
6. 阳性克隆的筛选及外源基因在原核细胞中的诱导表达。
7. 唾液细胞总RNA提取及逆转录合成cDNA。
8. 夜猫子基因推定及表达检测。
9. 转录因子HetR的凝胶阻滞分析。
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| 英文简介 |
The present course is an experimental teaching course opened for students majoring in biosciences. The technology commonly used in molecular biology will be taught in this course. Through several experiments, the students will not only learn the related technology, but also will realize how to use it in the practice of scientific research. This course includes following parts：
1. Extraction and purification of plasmid DNA.
2. Digestion of plasmid DNA with restriction endonucleases.
3. Agarose gel electrophoresis of DNA.
4. In vitro amplification of GFP gene by the polymerase chain reaction.
5. Construction of expression vector through Gibson assembly.
6. Identification of positive colonies and induction expression of foreign gene in prokaryotic cell.
7. Extraction of total RNA from salivary cells and its reverse transcription.
8. Detection of gene related to Delayed Sleep Phase Disorder (DSPD).
9. Electrophoretic mobility shift assay of transcription factor HetR.
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| 开课院系 |
生命科学学院 |
| 成绩记载方式 |
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| 通识课所属系列 |
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| 授课语言 |
英文 |
| 教材 |
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| 参考书 |
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| 教学大纲 |
使学生掌握基础分子生物学实验的基本原理，训练学生分子生物学实验的技能和操作。
1. 质粒DNA的分离纯化。了解质粒载体的基本结构特性，掌握提取纯化质粒DNA的技术，学会离心设备的使用，学会细菌的培养。（3学时）
2. DNA的限制性内切酶消化。了解限制性内切酶及酶切的条件，学会分析质粒DNA的酶切图谱。（2学时）
3. DNA琼脂糖凝胶电泳。系统掌握琼脂糖凝胶电泳的基本技术，学会分析电泳图谱。（3学时）
4. 利用PCR技术扩增GFP基因。使学生了解用PCR进行基因扩增的原理，引物设计原则和设计软件、影响因素及注意事项等。（4学时）
5. Gibson assembly构建pET28a-EGFP表达载体。利用无缝克隆技术构建增强型绿色荧光蛋白表达载体并转入大肠杆菌感受态细胞。了解多种克隆方法，重点掌握Gibson assembly技术。（6学时）
6. 阳性克隆的筛选及外源基因在原核细胞中的诱导表达。了解筛选阳性克隆的方法，学习DNA测序结果比对等。学习在原核细胞中诱导表达外源基因的方法。（4学时）
7. 唾液细胞总RNA提取及逆转录合成cDNA。掌握生物组织总RNA 制备及其纯度鉴定的基本方法, 学习逆转录合成cDNA的技术。（4学时）
8. 夜猫子基因推定及表达检测。通过RT-PCR和实时荧光定量PCR技术多维度学习基因检测技术。（4学时）
9. DNA的凝胶阻滞分析。了解科研中研究生物大分子相互作用的各种方法，掌握分析DNA和蛋白质相互作用的常用方法。
（4学时）
本课程旨在培训学生分子生物学基本的实验方法和技术。在实验过程中使学生掌握基础分子生物学实验的基本原理和结果分析方法，并得到相应的实验技能和操作训练。
将课堂成绩和实验报告成绩汇总即为学期成绩。课堂成绩包括预习、实验操作、实验结果等。
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| 教学评估 |
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